Diabetologia：激活但功能受损的记忆Tregs在1型糖尿病患者进展缓慢的过程中逐渐扩张

从第一次用到胰脏胃溃疡反应会到用到1标准型冠心病药理学症状的的工业发展率在老年人时期就有不错的描绘显现出，多个胰脏胃溃疡反应会乙标准型肝炎的老年人中的有70%在血清转换后10年内患病冠心病，而随访15年的老年人这一%-增高到84%。相较之下，占药理学1标准型冠心病一半以上的标准型1标准型冠心病的肺癌前提还不会得不到充分的研究成果。

日渐多的人开始用作分期系统来定义1标准型冠心病的的工业发展：生殖在用到多种胰脏胃溃疡反应会时重回第1过渡期，用到血糖反常时重回第2过渡期，用到症状时重回第3过渡期。一些多发胰脏胃溃疡反应会乙标准型肝炎的生殖，在1期和2期，的工业发展更快，并工业发展为肺癌的1标准型冠心病。我们早先描绘显现出了举例来说在首次样品到多种胰脏胃溃疡反应会检验后多于10年无冠心病的极较慢的工业发展者，这小组病人人数少，但特性非常指明。随后，我们发现胰脏自身特异性特异性CD8+T细胞膜反应会在的工业发展比更快的病人中的基本不存在，但在近期肺癌和长期存在的冠心病病人中的很容易样品到。这可能得显现出结论，与的工业发展病人相较，这些病人胃溃疡反应会的调节增强。

早期研究成果得显现出结论，尽管调节性T细胞膜(Treg)数量正常，但冠心病病人存在一些功用原因，其中的之外对IL-2的反应会能力提高。此外，冠心病病人中的的effectCD4+T细胞膜可能对调节更为具抵抗性，表现为effectT细胞膜的选择性减弱，自然消除的Treg和游离消除的诱导Treg，以及特异性境况的CD4+T细胞膜中的IL-2反应会减弱。本研究成果的目的是描绘显现出了CD4+调节性T细胞膜(Treg)在一小群极比更快的工业发展者中的的特性，他们的同期为43岁(31-72岁)，随访时间为18-32年。

原理：BOX研究成果是一项以人群为基础的纵向研究成果，在21岁以下肺炎的病人亲属中的检查1标准型冠心病的凶险因素。我们早先描绘显现出了长期比更快的工业发展者的特性，他们依然多重胰脏胃溃疡反应会乙标准型肝炎超过10年，但不会用到冠心病的药理学症状，较慢性或非透过性胃溃疡。随后，10名之前依然无冠心病并愿意提供大量血液检验的比更快的工业发展者确立T和B细胞膜功用分析。在现今的研究成果中的，8名较慢的工业发展者(SP小组)，中的位年龄43岁(31-72岁)，18 - 32岁间的胰脏胃溃疡反应会乙标准型肝炎。所有的小组织者都东南面1标准型冠心病的工业发展的1期，尽管一些人随后失去了胰脏胃溃疡反应会对某些特异性的乙标准型肝炎反应会，然而，一名病人不太可能东南面2期多于6年，但不会用到药理学症状，一名病人被诊断为冠心病，该受试者72岁，在采集实验检验时，其HbA1c升高到53 mmol/mol(7%)，在科研人员中的对该NAD透过了单独风险评估。分离外周血单个核细胞膜(PBMCs)，选用多参数流式细胞膜拳法和T细胞膜选择性试验风险评估NAD中的Treg的高频率、表现标准型和功用。用作FlowSOM和CITRUS(聚类认定、也就是说和紧接著)透过无委派聚类分析，风险评估Treg表现标准型。

结果：与肥胖症NAD相较，来自较慢的工业发展体的失忆CD4+T细胞膜的委派聚类推测，激活着的失忆CD4+ Treg高频率增高，与糖皮质激素诱导的TNFR相关细胞内(GITR)理解增高有关。一名HbA1c升高的病人与的工业发展比更快者和匹配的印证小组相较，Treg谱并不相同。功用分析得显现出结论，与肥胖症NAD相较，来自比更快的工业发展体的Treg内源性的CD4+effectT细胞膜选择性引人注意损毁。表现为对effectCD4+T细胞膜CD25和CD134理解的选择性增高。

绘显现出1 了解的表现标准型分析推测，CD4+Treg亚标准型在较慢的工业发展数据流中的增高。由FlowSOM分解成的Treg室，聚集地在来自所有NAD的活着CD4+CD45RA -细胞膜上。根据标示显现出物理解认定显现出10个元簇:失忆T细胞膜_1;失忆T cell_2;失忆T cell_3;失忆T cell_4;CD49b失忆T细胞膜;HLA-DR + GITR +失忆T细胞膜;内核Treg_1;内核Treg_2;内核Treg_3;和内核Treg_4。(a)用作9个多种不同Treg标示显现出分解成的10个元簇的MST。每个端口均是由一个坦克部队(100个坦克部队)，更为大的元坦克部队(10个元坦克部队)在端口小组周围上色。每个端口中的的饼绘显现出声称单个标示显现出的理解级别。(b)每个元聚类的热绘显现出，以推测既有标示显现出理解。(c, d)为HD小组(c)和SP小组(d)分解成绘显现出，以及FlowSOM辨别的每个元簇的大块。(e-l)相对来说稀土元素为每个metacluster木箱该线绘显现出(稀土元素> 0.05%)断定为HD和SP小组:内核Treg_2 (e),内核Treg_3 (f),内核Treg_4 (g), HLA-DR + GITR +失忆T细胞膜(h)、失忆T cell_1(i),失忆T cell_2 (j),失忆T cell_3 (k) n d CD49b失忆T细胞膜(l)。粉红色边框均是由**SP 606。**p< 0.01, Wilcoxon配对符号秩检验。此键适用于绘显现出形部分(a)， (c)， (d)和d (e-l)

绘显现出2 用作CITRUS的预测模标准型猜测，Treg高频率的增高是的工业发展比更快的标志。分级离子通道(a - f)和柑橘分析(g-k)比较SP小组织者和匹配的HD小组织者在CD4+CD45RA−T细胞膜上的歧异。(a)亲本CD25+ cd127 lotreg和CD25loCD127+T c e l个体的近现代绘显现出。CD25+ cd127lotreg被CD39和FOXP3硫化物，然后通过HLA-DR和GITR理解透过分离，模拟FlowSOM个体。(b) HD(外缘)和SP(蓝点)小组以及NADSP 606(粉红色)中的CD25+ cd127的高频率核心内容绘显现出。(c-f) CD25+CD127loCD39+FOXP3+和CD25loCD127+离子通道同构的木箱该线绘显现出;(c) HLA-DRloGITR−(内核Treg_2)， (d) HLA-DRintGITRlo(内核Treg_3)， (e) HLA- d RhiGITR+(内核Treg_4)， (f) HLA- d RhiGITR+(HLA-DR+GITR+内核T cell)。(g - i)柑橘簇螺旋由(g) CD127， (h) CD25和(i) FOXP3理解数值着色，上标显现出彩的簇被辨别为SP和HD数据流间的多种不同。(j)木箱该线绘显现出推测了在SP(蓝点)和HD(灰点)小组中的，CITRUS失忆Treg_3和Treg_4的相对来说稀土元素(%-)。(k)直方绘显现出推测每个簇的表现标准型(粉红色)和Treg标示显现出相对来说理解与文化背景理解(蓝色);上列，内核Treg_3;示例一行，内核Treg_4。文化背景与所有其他簇中的标示显现出的理解有关。*p< 0.05， **p< 0.01, Wilcoxon配对符号秩检验

绘显现出3 与肥胖症献血者相较，的工业发展比更快者失忆treg的GITR增高。每个失忆CD4+T细胞膜元簇(失忆T细胞膜_1;失忆T cell_2;失忆T cell_3;CD49b +失忆T细胞膜;HLA-DR + GITR +失忆T细胞膜;内核Treg_2;内核Treg_3;来自FlowSOM的memory Treg_4)样品每个理解标示显现出的变动。(a,b)来自HD (a)和S (b)数据流的理解热绘显现出(sp606不之外在内)。(c,d)失忆Treg_4元簇中的所有HD(灰色)、所有SP(蓝色)和SP 606(粉红色)的FlowSOM GITR理解串联，推测直方绘显现出(c)和核心内容绘显现出(d)。Wilcoxon配对符号秩和检验，p< 0.07(粉红色)所有NAD之外，p< 0.05(蓝色)NADSP 606和匹配的HD不之外在测试中的。(e,f) HLA-DRhiGITR+Tregs中的GITR理解，从分级离子通道，从所有HD(灰色)、所有SP(蓝色)和SP 606(粉红色)串联，推测直方绘显现出(e)和核心内容绘显现出(f) *p< 0.05, Wilcoxon配对符号秩检验

绘显现出4 来自比更快的工业发展的CD4+ treg细胞膜控制effectCD4+T细胞膜的能力提高。SP小组用蓝色的该线和边框声称，HD小组用银色的该线和边框声称，粉红色的该线/边框声称NADsp606。用作CD4+CD25+ Treg分选试剂盒对CD4+T细胞膜透过分选。CD4+CD25−(反之亦然者)被标示显现出为CFSE, Treg按掩蔽的%-起始。用抗CD3 /28微珠酪氨酸细胞膜，培养显现出来3紧接著透过流式细胞膜拳法样品。(a-d)与CD4+反之亦然者相对来说应的treg培养显现出来(自体)(e-h) HD、SP或SP 606 Treg与HD反之亦然者培养显现出来。(a,b,f) CFSE诱导(a,e)和CFSE选择性百份(b,f)。(c, d,h) CD25 (c,g)和CD134 (d,h)的选择性百份。用作乙标准型肝炎印证(激活着的鼓动细胞膜都有treg)计算选择性百份。*p< 0.05， **p< 0.01， ***p< 0.001，重复测量双向方差分析。†p < 0.0 5 Bonferroni的事后多重比较测试

绘显现出5 effectCD4+T细胞膜对比更快的工业发展的T细胞膜酪氨酸的选择性更为尖锐。SP小组用蓝色的该线和边框声称，HD小组用银色的该线和边框声称，粉红色的该线/边框声称NADsp606。用作CD4+CD25+Treg分选试剂盒对CD4+T细胞膜透过分选。CD4+CD25−(反之亦然者)被cfsel标示显现出，treg按掩蔽的%-起始。用抗CD3 /28微珠酪氨酸细胞膜，培养显现出来3紧接著透过流式细胞膜拳法(CD25反染)和细胞膜因子分析。HD Treg与HD、SP或sp606反之亦然者共同培养显现出来。(a,b) CFSE诱导(a)和CFSE选择性花红(b)。(c,d) CD25选择性花红(c)和CD134选择性花红(d)。(e,f) IFN-γ(e)和IL-17A (f)在共培养显现出来中的的理解。***p< 0.001， **p< 0.01，重复测量双向方差分析。†p < 0.0 5 Bonferroni的事后多重比较测试

论断：我们得显现出的论断是，来自比更快的工业发展子的酪氨酸失忆CD4+Treg在GITR理解中的得不到了扩展和丰富，强调了进一步研究成果Treg在1标准型冠心病风险生殖中的的异质性的重要性。

原文显现出处：

Boldison J, Long AE, Aitken RJ,et al.Activated but functionally impaired memory Tregs are expanded in slow progressors to type 1 diabetes.Diabetologia 2021 Oct 28