Diabetologia：激活但功能受损的记忆Tregs在1型糖尿病患者进展缓慢的过程中逐渐扩展到

从第一次显现出有肾脏自身病原形体到显现出有1改进型癌症病患患者的方面率在成年人时期就有很好的描述，多个肾脏自身病原形体非典型的成年人中所有70%在血液类比后10周内身患癌症，而随访15年的成年人这一%-减小到84%。值得注意之下，九成病患1改进型癌症一半以上的改进型1改进型癌症的复发机制还很难赢取充分的研究成果。

日渐多的人开始运用于应于系统来定义1改进型癌症的方面：幼形体在显现出有多种肾脏自身病原形体时进到第1期中，显现出有低血糖异常时进到第2期中，显现出有患者时进到第3期中。一些多发肾脏自身病原形体非典型的幼形体，在1期和2期，方面较比更慢，并发展为复发的1改进型癌症。我们在此之前描述了一第三组在首次探测到多种肾脏自身病原形体结果显示后至正因如此多10年无癌症的正因如此比更慢方面者，这第三组患者人数正因如此多，但特征非常一致。随后，我们发现肾脏自身肝细胞免疫CD8+T细胞膜反应会在方面缓比更慢的患者中所基本不共存，但在最近复发和曾一度共存的癌症患者中所很容易探测到。这可能会表明，与方面患者值得注意，这些患者自身病原形体的可调增强。

早期研究成果表明，尽管可调性T细胞膜(Treg)总数正常，但癌症患者共存一些基本功能缺陷，其中所仅限于对IL-2的反应会战斗能力提高。此外，癌症患者中所的effectCD4+T细胞膜可能会对可调增添抵抗性，形体现为effectT细胞膜的抑制作用增强，自然归因于的Treg和形体外归因于的正向Treg，以及肝细胞经历的CD4+T细胞膜中所IL-2反应会增强。本研究成果的用以是描述了CD4+可调性T细胞膜(Treg)在在在正因如此缓比更慢方面者中所的特征，他们的平均年龄为43岁(31-72岁)，随访星期为18-32年。

方法：BOX研究成果是一项以老年人为基础的中轴研究成果，在21岁不限发病的患者次子女中所检查1改进型癌症的危险环境因素。我们在此之前描述了曾一度缓比更慢方面者的特征，他们保有多重肾脏自身病原形体非典型超过10年，但很难显现出有癌症的病患患者，比更慢性或非顺利完成性致病。随后，10名在此之后保有无癌症并愿意获取大量血液结果显示的缓比更慢方面者归入T和B细胞膜基本功能数据分析。在在此在此之前的研究成果中所，8名比更慢方面者(SP第三组)，中所位年龄43岁(31-72岁)，18 - 32岁之间的肾脏自身病原形体非典型。所有的参与者都位处1改进型癌症方面的1期，尽管一些人随后丧失了肾脏自身病原形体对某些肝细胞的非典型反应会，然而，一名患者不太可能会位处2期至正因如此多6年，但很难显现出有病患患者，一名患者被病患为癌症，该受试者72岁，在通过观察实验结果显示时，其HbA1c上升时到53 mmol/mol(7%)，在数据数据分析中所对该遗传物质顺利完成了基本上评核。复合外周血单个核细胞膜(PBMCs)，使用多参数流式细胞膜奥义和T细胞膜抑制作用试验评核遗传物质中所Treg的Hz、表改进型和基本功能。运用于FlowSOM和CITRUS(聚类鉴定、举例来说和回归)顺利完成无行政官员聚类数据分析，评核Treg表改进型。

结果：与生活品质遗传物质值得注意，来自比更慢方面形体的知觉CD4+T细胞膜的行政官员聚类说明了，激光阴的知觉CD4+ TregHz减小，与糖皮质激素正向的TNFR系统性蛋白(GITR)隐含减小有关。一名HbA1c上升时的患者与方面缓比更慢者和匹配的对照第三组值得注意，Treg谱有所完全相同。基本功能值得注意较，与生活品质遗传物质值得注意，来自缓比更慢方面形体的Treg介导的CD4+effectT细胞膜抑制作用明显受损。形体现为对effectCD4+T细胞膜CD25和CD134隐含的抑制作用减小。

平面图1 深入的表改进型数据分析说明了，CD4+Treg亚改进型在比更慢方面数据流中所减小。由FlowSOM生成的Treg室，聚集在来自所有遗传物质的光阴CD4+CD45RA -细胞膜上。根据标明物隐含鉴定出有10个元簇:知觉T细胞膜_1;知觉T cell_2;知觉T cell_3;知觉T cell_4;CD49b知觉T细胞膜;HLA-DR + GITR +知觉T细胞膜;内核Treg_1;内核Treg_2;内核Treg_3;和内核Treg_4。(a)运用于9个完全相同Treg标明生成的10个元簇的MST。每个终端都有一个一个大(100个一个大)，非常大的元一个大(10个元一个大)在终端第三组四周制做。每个终端中所的糕平面图问到单个标明的隐含级别。(b)每个元聚类的热平面图，以说明了连续性标明隐含。(c, d)为HD第三组(c)和SP第三组(d)生成平面图，以及FlowSOM比对的每个元簇的覆盖层。(e-l)一般来说同位素为每个metacluster装入新线平面图(同位素> 0.05%)具体为HD和SP第三组:内核Treg_2 (e),内核Treg_3 (f),内核Treg_4 (g), HLA-DR + GITR +知觉T细胞膜(h)、知觉T cell_1(i),知觉T cell_2 (j),知觉T cell_3 (k) n d CD49b知觉T细胞膜(l)。紫色左上角都有捐助者SP 606。**p< 0.01, Wilcoxon类推符号秩检验。此键适用于平面图形部分(a)， (c)， (d)和d (e-l)

平面图2 运用于CITRUS的系统结构证实，TregHz的减小是方面缓比更慢的图标。级别去极化(a - f)和柑桔数据分析(g-k)比较SP参与者和匹配的HD参与者在CD4+CD45RA−T细胞膜上的差异。(a)亲本CD25+ cd127 lotreg和CD25loCD127+T c e l群形体的都有性平面图。CD25+ cd127lotreg被CD39和FOXP3富集，然后通过HLA-DR和GITR隐含顺利完成复合，实时FlowSOM群形体。(b) HD(黑点)和SP(蓝点)第三组以及遗传物质SP 606(紫色)中所CD25+ cd127的Hz统计平面图。(c-f) CD25+CD127loCD39+FOXP3+和CD25loCD127+去极化次子集的装入新线平面图;(c) HLA-DRloGITR−(内核Treg_2)， (d) HLA-DRintGITRlo(内核Treg_3)， (e) HLA- d RhiGITR+(内核Treg_4)， (f) HLA- d RhiGITR+(HLA-DR+GITR+内核T cell)。(g - i)柑桔簇折叠由(g) CD127， (h) CD25和(i) FOXP3隐含强度着色，左下角突出有的簇被比对为SP和HD数据流之间的完全相同。(j)装入新线平面图说明了了在SP(蓝点)和HD(灰点)第三组中所，CITRUS知觉Treg_3和Treg_4的一般来说同位素(%-)。(k)直方平面图说明了每个簇的表改进型(红色)和Treg标明一般来说隐含与取材隐含(紫色);上列，内核Treg_3;下面一行，内核Treg_4。取材与所有其他簇中所标明的隐含有关。*p< 0.05， **p< 0.01, Wilcoxon类推符号秩检验

平面图3 与生活品质献血者值得注意，方面缓比更慢者知觉treg的GITR减小。每个知觉CD4+T细胞膜元簇(知觉T细胞膜_1;知觉T cell_2;知觉T cell_3;CD49b +知觉T细胞膜;HLA-DR + GITR +知觉T细胞膜;内核Treg_2;内核Treg_3;来自FlowSOM的memory Treg_4)探测每个隐含标明的波动。(a,b)来自HD (a)和S (b)数据流的隐含热平面图(sp606不仅限于在内)。(c,d)知觉Treg_4元簇中所所有HD(黄褐色)、所有SP(紫色)和SP 606(紫色)的FlowSOM GITR隐含并联，说明了直方平面图(c)和统计平面图(d)。Wilcoxon类推符号秩和检验，p< 0.07(紫色)所有遗传物质仅限于，p< 0.05(紫色)遗传物质SP 606和匹配的HD不仅限于在测试中所。(e,f) HLA-DRhiGITR+Tregs中所GITR隐含，从级别去极化，从所有HD(黄褐色)、所有SP(紫色)和SP 606(紫色)并联，说明了直方平面图(e)和统计平面图(f) *p< 0.05, Wilcoxon类推符号秩检验

平面图4 来自缓比更慢方面的CD4+ treg细胞膜控制effectCD4+T细胞膜的战斗能力提高。SP第三组用紫色的新线和左上角问到，HD第三组用黄色的新线和左上角问到，紫色的新线/左上角问到遗传物质sp606。运用于CD4+CD25+ Treg分选试剂盒对CD4+T细胞膜顺利完成分选。CD4+CD25−(此番者)被标明为CFSE, Treg按捕捉到的%-校准。用抗CD3 /28微珠正向细胞膜，培植3当晚顺利完成流式细胞膜奥义探测。(a-d)与CD4+此番者一般来说应的treg培植(其会)(e-h) HD、SP或SP 606 Treg与HD此番者培植。(a,b,f) CFSE抑制(a,e)和CFSE抑制作用多于(b,f)。(c, d,h) CD25 (c,g)和CD134 (d,h)的抑制作用多于。运用于非典型对照(激光阴的自发细胞膜不含treg)计算抑制作用多于。*p< 0.05， **p< 0.01， ***p< 0.001，重复测量双向方差数据分析。†p < 0.0 5 Bonferroni的事后多重比较测试

平面图5 effectCD4+T细胞膜对缓比更慢方面的T细胞膜正向的抑制作用更敏感。SP第三组用紫色的新线和左上角问到，HD第三组用黄色的新线和左上角问到，紫色的新线/左上角问到遗传物质sp606。运用于CD4+CD25+Treg分选试剂盒对CD4+T细胞膜顺利完成分选。CD4+CD25−(此番者)被cfsel标明，treg按捕捉到的%-校准。用抗CD3 /28微珠正向细胞膜，培植3当晚顺利完成流式细胞膜奥义(CD25反染)和细胞膜因次子数据分析。HD Treg与HD、SP或sp606此番者共同培植。(a,b) CFSE抑制(a)和CFSE抑制作用百分率(b)。(c,d) CD25抑制作用百分率(c)和CD134抑制作用百分率(d)。(e,f) IFN-γ(e)和IL-17A (f)在研究成果生院中所的隐含。***p< 0.001， **p< 0.01，重复测量双向方差数据分析。†p < 0.0 5 Bonferroni的事后多重比较测试

结论：我们得出有的结论是，来自缓比更慢方面次子的正向知觉CD4+Treg在GITR隐含中所赢取了扩张和多样化，强调了进一步研究成果Treg在1改进型癌症安全性幼形体中所的基因型的必要性。

原文典故：

Boldison J, Long AE, Aitken RJ,et al.Activated but functionally impaired memory Tregs are expanded in slow progressors to type 1 diabetes.Diabetologia 2021 Oct 28